Главная » 2014 » Август » 27 » Скачать Регуляция активности цитохромов Р450 химическими и физическими факторами. Гришаева, Алевтина Юрьевна бесплатно
1:53 AM
Скачать Регуляция активности цитохромов Р450 химическими и физическими факторами. Гришаева, Алевтина Юрьевна бесплатно
Регуляция активности цитохромов Р450 химическими и физическими факторами
Диссертация
Автор: Гришаева, Алевтина Юрьевна
Название: Регуляция активности цитохромов Р450 химическими и физическими факторами
Справка: Гришаева, Алевтина Юрьевна. Регуляция активности цитохромов Р450 химическими и физическими факторами : диссертация доктора биологических наук : 03.00.04 / Гришаева Алевтина Юрьевна; [Место защиты: ГУ "Научно-исследовательский институт биохимии Сибирского отделения РАМН"] - Новосибирск, 2007 - Количество страниц: 0 с. 220 ил. Новосибирск, 2007 220 c. :
Объем: 220 стр.
Информация: Новосибирск, 2007
Содержание:
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
11 Ферменты моноокснгеназпой системы
111 Суоерсемейство цктохромов Р
1111 Индукция цнтохромов Р450 ксенобиотиками 1 б
1112 Подсемейство CYP1А
1213 Подсемейство CYP2A
1114 Подсемейство СYP2B
1215 Подсемейство CYP2C
1216 Подсемейство CYP3A
122 НАДФН-цитохром Р450 редуктаза
12 Механизмы регуляции экспрессии цнтохромов P45Q
121 Регуляция генов CYP1A
I211 Индукция CYP1А полициклическими ароматическими углеводородами
II12 Некласснческие экзогенные индукторы CYP1А
1213 Эндогенные индукторы CYP 1А1
1214 Негативная регуляция CYP 1А
122 Регуляция генов CYP2B
1221 Индукция экспрессии СУР2В через дистальный промотор
1222 Участие проксимального промотора в индукции генов CYP2B 39 1223 Другие регу ляториые элементы генов CYP2B
123 Регуляция генов CYP2C
124 Регуляция генов CYP2A
135 Регуляция генов CYP3A
13 Химические соединения, влияние которых на моноокенгеназную систему печени исследовалось в настоящей работе
131 Полностью фторированное органическое соединение перфтордекалин
132 Пиридин и пиридин-И-оксид 49 13 3 Ннфеднпин
134 Витамин Е (а-токоферол)
135 Витамин К функции в организме и влияние на цитохром Р
136 Кверцетии 60 137 Билирубин
14 Физические факторы, влияние которых на монооксигеназиую систему печени исследовалось в настоящей работе
151 Лазерное излучение
152 Электромагнитные колебания сантиметрового диапазона
153 Ультразвук низкой интенсивности
154 Радиация
155 ХоиодовоК фактор
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
21 Материалы
22 Животные
221- Экспериментальные процедуры с животными
23 Методы исследования
231 Выделение микросом из печени крыс
232 Определение количества белка в микросомах
233 Определение количества цитохромов Р
234 Определение активности НАДФН-цитохром Р450 редуктазы
235 Выделение и очистка CYP2B1 и CYP2B2 из микросом печени крыс, индуцированных фенобарбиталом
236 Выделение и очистка CYP1A1 и CYP1А2 из микросом печени крыс, индуцированных 3-метилхолантреном
237 Получение моноспецнфических поликлональных антител
238 Получение моноклональных антител
239 Иммунохимический анализ белков микросом
2310 Определение активности CYP1A, CYP2A, CYP2B, CYP2C и CYP3A в микросомах печени крыс
2311 Выделение суммарной РНК из клеток печени крыс
2312 Электрофорез РНК в частично денатурирующих условиях
2313 Определение концентрации и чистоты РНК 95 2-314 Определение относительного содержания мРНК CYP1A1, СУР1А2 95 2315- Выделение экстракта ядер клеток печени
2316 Определение белка в экстрактах ядер
2317 Приготовление зонда для ДНК/белкового связывания
2318 Анализ ДНК/белковых комплексов
2319 Количественное определение малонового диальдегида 99 2319 Определение токоферолов в микросомах печени крыс 99 2 320 Определение концентрации внеэрнтроцнтарного гемоглобина 100 2321 Определение общего и коньюгированного билирубина
24 Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
31 Исследование влняния химических соединений на ферменты монооксигеназной системы печени
311 Влияние перфтордекалина на активности ферментов монооксигеназной
312 Влияние пиридина и пиридин-Ы-оксида ш монооксигеназной системы печени 10:
313 Влияние нифеднпина на активность ферментов монооксигеназной системы
314 Влияние а-токоферола на активность ферментов монооксигеназной системы печени 1К
315 Влияние менадиоиа на активность ферментов монооксигеназной системы
316 Влияние кверцетина на активность CYP1A в микросомах печени 1 Г
317 Влияние билирубина на активность CYPl А! в микросомах печени 11!
32 Исследование механизмов индукции активности CYP1A1 и CYP1A2 в печени крыс «некласснческнмн» нндукторамн
32,1 Молекулярные механизмы, лежащие в основе индукции активности CYP1А а-токоферолом
3-22 Молекулярные механизмы, лежащие в основе индукции активности CYPIA менадионом
323 Молекулярный механизм, лежащий в основе индукции активности CYP1AI билирубином
324 Исследование способности а-токоферола, менадиоиа и билирубина активировать AhR
33 Исследование цитохромов Р450 подсемейства 1А при совместном введении классического индуктора бснзо(а)пнрена и «слабых» индукторов а-токоферола и менадиоиа и лнганда AhR кверцетпна
331 Влияние а-токоферола и менаднона на экспрессию генов CYP1A при совместном введении с бензо(а)пиреном т vivo
332 Влияние кверцетина на экспрессию генов CYP1A при совместном введении с бензо(а)пиреном in vivo
333 Влияние менадиоиа и кверцетина на ДНК-связывающую способность AhR
34 Ферменты моноокенгеназной системы печени в условиях действия физических факторов
341 Влияние низкоинтенсивного инфракрасного лазерного излучения на ферменты моноокенгеназной системы печени
342 Влияние ультразвука низкой интенсивности на ферменты моноокенгеназной системы печени
343 Влияние электромагнитного излучения сантиметрового диапазона на ферменты моноокенгеназной системы печени 145 3 4 4 Влияние ионизирующего излучения на ферменты моноокенгеназной системы печени
345 Влияние холодового воздействия на ферменты биотрансформации в печени крыс
35 Исследование механизмов индукции активности CYP1A в печени крыс под действием физических факторов
351 Исследование механизма индукции CYP1A1 под действием ультразвука
352 Исследование механизма индукции CYPIA1 под действием холода
36 Роль эндогенных соединений в индукции CYP1А под действием физических факторов
361 Исследование роли билирубина в индукции CYP1А1 в печени под действием ультразвука
362 Исследование роли а-токофероя и билирубина в индукции CYP1А1 в печени под действием холода
Введение:
Актуальность проблемы. Клеточные мембраны являются эффективным барьером для защиты клетки от многих токсических водорастворимых соединений, но яе защищают от липофильных ксенобиотиков, которые, яегко преодолевая эту границу, могут накапливаться как в самой клетке, так и ее мембране. Одним из важных механизмов защиты клетки и организма в целом от таких ксенобиотиков является биотрансформация - превращение липофильных соединений в более гидрофильные и легко удаляемые из организма соединения. Метаболизм огромного числа липофильных ксенобиотиков (лекарств, канцерогенов, пищевых добавок, компонентов загрязнения окружающей среды и др.) осуществляет ферментная система, названная микросомной монооксигеназной системой со смешанными функциями (Omura, Sato, 1964). Монооксигеназная система участвует также в метаболизме гидрофобных эндогенных соединений, включающих стероиды, простагландины. жирные и желчные кислоты и другие. Биотрансформация в большинстве случаев ведет к детоксикации образованию биологически неактивных метаболитов, однако возможна и активация превращение нетоксичных и проканцерогеных соединений в продукты с токсическими и канцерогенными свойствами.
Широкая субстратная специфичность монооксигеназной системы обеспечивается множественными формами цитохрома Р450 (CYP) гемопротеинами. кодируемыми суперсемейством генов CYP (Nelson el аЦ 1996, Nebert. Russel, 2002). Важным свойством многих цитохромов Р450 является их способность к увеличению активности в ответ на введение различных ксенобиотиков. С описания более 40 лет назад феномена индукции цитохрома Р450 (Conney et al., 1960, Remmer. Merker, 1963) впервые возникло представление о множественности форм цитохрома Р450. По современной номенклатуре все многообразие цитохромов Р450 разделено на семейства и подсемейства (Nebert, Russel, 2002). У млекопитающих насчитывается 17 различных семейств. 4 из которых (СУР 1-4) кодируют ферменты, метаболизирующие ксенобиотики. Особый интерес представляют подсемейства CYP1A, CYP2B, CYP2C и CYP3A. которые являются главными компонентами микросомной монооксигеназной системы печени млекопитающих. CYP3A, CYP2C и CYP2B участвуют в метаболизме подавляющего числа лекарств, a CYP1A осуществляют метаболическую активацию многих соединений, превращая их в продукты с токсическими и канцерогенными свойствами.
Среди индукторов цитохромов Р450 выделяют несколько групп, различающихся по спектру индуцируемых ими форм цитохрома Р450, типичными представителями которых являются полициклические ароматические углеводороды (Г1АУ) и галогенированные диоксины, барбитураты, рифампиции и дексаметазон. этанол, клофибрат.
К настоящему времени накоплены обширные сведения об индукции цитохромов Р450 подсемейства 1А (CYP1AI и CYP1A2) такими ксенобиотками, как ПАУ и галогенированные диоксины, которые активируют транскрипцию генов CYP1A через путь сигнальной трансдукции, зависимый от арилгидрокарбонового рецептора (AhR). Индукторами цитохромов P4S0 подсемейства 2В является огромное число структурно неродственных соединений. В механизмах регуляции генов СУР2В главную роль транскрипционных факторов играют ядерные рецепторы - CAR (конститутивный аядростановый рецептор) и PXR (прегнановый X рецептор). Гены CYP2A. СУР2С и CYP3A регулируются с участием GR (глюкокортикоидный рецептор), а также PXR и CAR (Honkakoski P., Negishi M„ 2000).
С тех пор, как был описан феномен индукции цитохрома Р450, в список индукторов включены уже сотни химических соединений. Однако исследование спектра соединений, которые могут индуцировать различные формы цитохрома Р450, по-прежнему актуально. Исследования последних десятилетий показывают, что нндукторами CYP1A являются не только ПАУ и диоксины с пленарной структурой, но и соединения иных химических классов (индолы, каротиноиды) (Denison M.S-, Nagy S.R., 2003; Krusekopf S. et al„ 2003).
Необходимость изучения индуцирующих свойств ранее не исследовавшихся химических соединений определяется функциональной значимостью цитохромов Р450 в детокснкации разнообразных ксенобиотиков и метаболической активации многих соединений в активные канцерогены. Важно знать, как влияют на активность цитохромов Р450 те соединения, которые будут использовать в медицине в качестве лекарственных препаратов илн ином качестве, потому что в результате индукции или ингибирования цитохромов Р450 могут изменяться фармакокинетические характеристики лекарств, развиваться токсические последствия. Особый интерес представляют витамины, которые используются не только в качестве микронутриентов, но и в лечебных целях.
Вопрос о том, как физические воздействия на организм влияют на ферменты монооксигеназной системы, долгое время был вне интересов исследователей. Первые сообщения об изменении активности цитохрома Р450 в печени экспериментальных животных в отсутствие химических индукторов появилось в 198В году (Mann, et al., 1988, Okamoto, el al., 1993). Индукция P450 в отсутствие экзогенного химического индуктора были получены также на культурах клеток (кератиношггах, клетках гепатом). Такие воздействия, как гидродинамический сдвиг, суспеидирование культуры в среде с метилцеллюлозой, ультрафиолет н температура приводили к увеличению в клетках активности CYP1A1 (Monk, et al., 2001. Gonzalez, et al., 2001, Feng, et al., 2002). Одним из главных условий формирования физиологического ответа на физические воздействия является запуск биохимических реакций биологически активными продуктами, полученными или освобожденными из физиологического «депо» под действием физических факторов. В случае индукции цитохромов Р450 при действии физических факторов логично предполагать наличие эндогенных медиаторов, опосредующих запуск экспрессии соответствуюших генов.
Целью настоящей работы являлось исследование влияния химических соединений и физических воздействий на монооксигеназную систему печени экспериментальных животных и выяснение механизмов, лежащих в основе возможного модулирующего действия этих факторов на цитохромы Р450 подсемейства 1 А.
Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:
1. Охарактеризовать влияние на микросомную монооксигеназную систему печени крыс химических соединений, важных для медицинской практики (псрфтордекалина, нифедипина, менадиона, а-токоферола, кверцетина, билирубина), и сравнить с характеристиками монооксигеназной системы при введении животным классических индукторов цитохромов Р450 подсемейства 2В (фенобарбитала) и подсемейства 1А (бензо(а)пирена или 3-метилхолантрена).
2. Исследовать механизм индукции цитохромов Р450 подсемейства 1А под действием тех соединений, которые обнаружат способность увеличивать активность этих ферментов. Для этого оценить способность таких соединений вызывать изменение уровней мРНК CYP1A1 и CYP1A2 и белка CYP1A1 и CYP1A2 и исследовать влияние этих соединений на ДНК-связывающую активность Ah рецептора.
3. Исследовать активности цитохромов Р450 подсемейства 1А в печени крыс при совместном введении классического индуктора и тех соединений, которые обнаружат способность индуцировать цитохромы P4S0 подсемейства 1 А.
4 Охарактеризовать микросомную монооксигеназную систему печени крыс, подвергавшихся действию физических факторов, различных по своей природе: сверхвысокочастотных электромагнитных колебаний сантиметрового диапазона, низкоинтенсивного лазерного импульсного излучения инфракрасной области спектра, щпкоинтенсивкого ультразвука, ионизирующего излучения в малых дозах, умеренно низкой температуры.
5- Исследовать механизм индукции цитохромов Р450 подсемейства IА под действием тех физических факторов, которые будут влиять на активность этих ферментов, и исследовать роль эндогенных соединений в опосредовании индукции Р450 подсемейства 1А под действием физических факторов.
Основные положения работы, выносимые па защиту.
1 Перфтордекалин. основной компонент искусственной кровезамещающей среды с газотранспортными свойствами, и лекарственный препарат нифедипин оказывают влияние на ферменты монооксигеназной системы, сходное с действием фенобарбитала, увеличивая содержание CYP2B1/2B2 в микросомах печени экспериментальных животных и активность CYP2B1. Кроме этого, нифедипин при длительном введении увеличивает активность CYP3A. а-Токоферол. менадион, пиридин, и пиридин-N-оксид, являются индукторами ферментов биотрансформации ксенобиотиков смешанного типа, увеличивая активность CYP1A1, CYP1A2 и CYP2B1 в печени крыс.
2. Индукция CYP1A1 и CYP1A2 менадионом и CYP1A1 билирубином в печени крыс осуществляется на транскрипционном уровне с вовлечением сигнального пути Ah-рецептора. Под действием а-токоферола индукция CYP1A1 реализуется как на транскрипционном уровне с участием AhR-зависнмого пути сигнальной трансдукции. так и на постгранскрипционном. а индукция CYP1A2 - на посттранскрипционном уровне.
3. а-Токоферол. менадион и кверцетин in vivo снижают индуцирующее действие бензо(а)пирена на активность CYP1A1 и CYP1A2. Ингибирование БП-индуцнрованных активностей CYP1A1 и CYP1A2 менадионом и квериетином происходит вследствие снижения уровней мРНК CYP1A1 и CYP1A2. Ингибирующий эффект менадиона и кверцетина на экспрессию генов CYPIAJ и CYP1A2 может быть следствием снижения ДНК-связывающей способности AhR.
4. Физические факторы, различные по своей природе, при воздействии на организм экспериментальных животных вызывают изменение активностей различных форм цитохрома Р450 в печени: под влиянием электромагнитных колебаний сантиметрового диапазона изменяются активности CYP2A, CYP2C11. CYP3A, лазерного импульсного ИК излучения - CYP2B1, CYP2A, CYP2C11, CYP3A, низкоинтенсивного ультразвука - CYP1A1, CYP2A, CYP2C11, ионизирующего излучения в малых дозах - CYP1A2. CYP2A. CYP2CI1, умеренно низкой температуры - CYP1AI. CYP1A2. CYP2B1. CYP2C. CYP3A, CYPZEI.
5. Увеличение активности CYP1A1 в печени крыс под действием ультразвука и холода осуществляется на транскрипционном уровне с вовлечением AhR сигнального пути, а индукция CYP1A2 под действием холода - на посттранскрипционном уровне. 6 Роль эндогенных посредников в индукции CYP1А1 в печени под действием холода может выполнять а-токоферол, а под действием ультразвука - билирубин.
Научная новизна
В работе впервые проведено исследование влияния перфтордекалина и нифедипина на ферменты монооксигеназной системы печени. Показано, что перфтордекалин является мощным индуктором фенобарбиталового типа, значительно увеличивающим активность CYP2B1. Показано, что нифедипин при длительном введении вызывает индукцию CYP2B1 и CYP3A.
Впервые показана способность пиридина, пиридин-Ы-оксида, а-токоферола и менадиоиа - соединений, непохожих по структуре на классические индукторы CYP1 А, увеличивать активности CYP1A1 и CYP1A2 в печени крыс. Установлены механизмы увеличения активностей CYP1A1 и CYP1A2 под действием менадиона и сх-токоферола: индуцирующее влияние менадиона реализуется на транскрипционном уровне через AhR-зависимый путь сигнальной трансдукции, а индукция а-токоферолом осуществляется как на транскрипционном уровне через AhR-зависимый путь сигнальной трансдукции. так и на посттранскрипционном уровне.
Впервые установлено, что билирубин in vivo регулирует экспрессию гена CYP1AI AhR-зависимым путем.
Показана способность а-токоферола, менадиона и кверцетнна ингибировать in vivo индуцируемые бензо(о.)пиреном активности CYP1A1 и CYPIA2. Установлен механизм, лежащий в основе ингибирующего эффекта менадиоиа и кверцетнна на бензо(а)пирен-опоередованную индукцию CYP1A1 и CYP1А2, который реализуется на транскрипционном уровне. Ингибнрование менадионом и кверцетином бензо(а)пирен-индуцируемых CYP1A1 и CYP1A2 связано со снижения ДНК-связывающей способности AhR.
В работе проведено исследование in vivo влияния различных по природе физических факторов на ферменты монооксигеназной системы печени и впервые показано, что действие физических факторов на организм вызывает изменение активности различных форм цитохрома Р450 в печени.
Обнаружено индуцирующее влияние ультразвука и холода на активность CYP1A1 печени крыс. Показано, что регуляция CYP1A1 в печени при ультразвуковом воздействии осуществляется на транскрипционном уровне AhR-зависимым путем, и одним из эндогенных посредников в индукции CYP1A1 под действием ультразвука является билирубин. Установлен механизм индукции CYP1A1 в печени при воздействии на организм холода, который состоит в транскрипционной активации гена CYPIAI с участием AhR. Показано, что эндогенным посредником в индукции CYP1A1 под действием холода может быть а-токоферол.
Научная и практическая значимость.
Настоящая работа вносит вклад в развитие фундаментальных знаний об индукции цнтохромов Р450. В результате исследования влияния химических соединений на активность монооксигеназной системы в список индукторов цнтохромов Р450 подсемейства 1А включены соединения, отличающиеся по химической структуре от классических ПАУ и диоксинов - это пиридин и пириднн-N-oKcwi, обладающие сильными индуцирующими свойствами, а также а-токоферол (витамин Е). менадион (витамин Кз) и билирубин, являющиеся слабыми индукторами CYP1A.
Полученные в работе данные демонстрируют неизвестные ранее последствия длительного применения витаминов Е и Kj в больших дозах - активацию экспрессии генов CYP1A подсемейства, имеющего отношение к метаболизму проканцерогенов.
Данные о снижении индуцирующего действия бензо(а)пирена на экспрессию генов CYP1A1 и CYP1A2 менадионом и кверцетином могут служить теоретической основой для исследования природных слабых индукторов CYP1A и/или активаторов AhR-зависимого пути сигнальной трансдукции. Такие соединения могут быть использованы для предотвращения возникновения и пролиферации гормон-зависимых опухолей за счет перекреста AhR-зависимого пути с путями сигнальной трансдукции рецепторов стероидных гормонов, и. возможно, возникновения опухолей, индуцированных полициклическими ароматическими углеводоролами.
Данные об индукции цнтохромов Р450 подсемейств 2В и ЗА нифедипином, широко использующимся лекарственным препаратом, указывают на возможность изменения фармакокинетики лекарств, являющихся субстратами этих форм цитохрома Р450, при одновременном их применении с нифедипином.
Полученные в период доклинических исследований данные о характере влияния перфтордеклина - одного из главных компонентов препарата искусственной крови «Перфторан». на монооксигеназную систему печени, позволили исключить возможность негативных последствий действия препарата на ферменты метаболизма ксенобиотиков. Показан фенобарбиталовый тип индукции цитохрома Р450 перфтордекалином и доказано отсутствие индукции форм цитохрома Р450. ответственных за активацию проканцерогенов и протоксинов.
Исследование активности моноокенгеназной системы в печени экспериментальных животных, подвергавшихся воздействию физическими факторами, показало, что индукция цитохромов Р450 является адаптивным ответом не только на чужеродные соединения, попадающие в клетки печени, но и на физические факторы, воздействующие на организм. В отсутствие экзогенных химических соединений роль индукторов цитохромов Р450 могут выполнять эндогенные соединения, уровень которых в организме повышается в ответ на физическое воздействие. Это необходимо учитывать при использовании физических воздействий в терапии. В комплексном лечении с использованием лекарственных препаратов и физиотерапии возможно изменение активности ряда форм цитохрома Р450 и, как следствие, изменении фармакокинетики лекарств, что может сказаться на эффективности лекарственной терапии.
Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы были представлены на 7-Й. 8-й Международных конференциях по биохимии, биофизике цитохрома Р450 (Москва, Россия, 1991; Лиссабон, Португалия. 1993); 5-й Всесоюзной конференции "Цитохром Р450 и модификация макромолекул" (Ялта, 1989); 3-м Международном симпозиуме по метаболизму чужеродных соединений (Лондон. Англия. 1989); 8-й Международном симпозиуме по микросомам и окислению лекарств (Стокгольм. Швеция. 1990); 3-м Международном ISSX симпозиуме по метаболизму лекарств (Амстердам. Голландия. 1991); Международном симпозиуме «Прогресс во внепеченочном метаболизме (Роннеби. Швеция, 1991); Международной конференции "Изоферменты: Организация и роль в эволюции» (Новосибирск.1991); Республиканском симпозиуме "Монооксигеназная система теоретические и прикладные аспекты" (Ташкент. Узбекистан, 1992); 4-м. 5-м Европейских ISSX симпозиумах (Болонья. Италия. 1992; Тур. Франция. 1993); 3-м Всемирном конгрессе международного общества по адаптивной медицине (Токио. Япония. 1993); 2-м Российском конгрессе по патофизиологии (Москва, 2000); 18-м Международном конгрессе по биохимии и молекулярной биологии (Бнрменгем, Англия. 2000); 10-м Греческом фармакологическом конгрессе (Афины. Греция, 2001); Национальной научно-практической конференции «Свободные радикалы, антиоксиданты и болезни человека»
Смоленск, 2001); 3-м Съезде биохимического общества России (Санкт-Петербург,
2002); 4-м Съезде физиологов Сибири (Новосибирск, 2002); 7-Й Конференции международного общества по биохимии и молекулярной биологии «Лиганд-рецепторные взанмодейстсвия» (Берген, Норвегия, 2002); Международной конференции «Реактивные формы кислорода и азота, антиокснданты и болезни человека» (Смоленск, 2003); 13-й Международной конференции по биохимии и биофизике цитохрома Р450 и метаболизму лекарств (Прага, Чешская Республика,
Работа выполнена при частичной финансовой поддержке грантов РФФИ N 96-0450209, N 02-04-48639, N 05-04-48327.
Публикации. По теме диссертации опубликована 71 научная работа. В ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендованных ВАК, опубликовано 35 статей.
Автор выражает благодарность научному консультанту, академику РАМН Ляховичу В.В. за постоянный интерес и поддержку этих исследований, коллегам сотрудникам Института молекулярной биологии и биофизики СО РАМН к.б.н. Гуткиной Н.И., к.б.н. Громовой О.А, д.б.н. Гуляевой Л.Ф., к.б.н. Макаровой С.И., Зуевой Т.В., Сидоровой Ю.А-, Перепечаевой М.Л. за плодотворную совместную работу, сотрудникам Института биологической физики РАН Пущинского научного центра к.б.н. Образцову В.В. и к.б.н. Шехтман Д.Г. за возможность участия в исследовании уникальных перфторорганических соединений и сотруднику Одесского института курортологии д.м.н. Золотаревой ТА. за интересное творческое сотрудничество
